ELISA（酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定）作為一種高度敏感和特異的免疫分析技術(shù)，其運(yùn)作基于三項(xiàng)核心原理，這些原理共同確保了檢測(cè)的準(zhǔn)確性和效率：

1. 固相吸附特性：ELISA技術(shù)的第一步涉及到將目標(biāo)抗原或抗體物理吸附至固相載體表面，通常是聚苯乙烯微孔板。這種吸附并非隨意，而是基于抗原或抗體分子與固相表面間的非共價(jià)相互作用，尤其是疏水性相互作用，這一過(guò)程保留了分子的免疫活性，使其能特異性識(shí)別并結(jié)合其對(duì)應(yīng)抗體或抗原。

2. 酶標(biāo)記的保持活性：接著，抗體或抗原會(huì)被共價(jià)連接到酶分子上，形成所謂的酶標(biāo)記物。這個(gè)過(guò)程對(duì)保持酶的催化活性和抗體/抗原的免疫識(shí)別能力至關(guān)重要。酶標(biāo)記物能在保持免疫學(xué)特性的基礎(chǔ)上，通過(guò)其催化活性對(duì)底物進(jìn)行轉(zhuǎn)化，從而生成可檢測(cè)的信號(hào)，如顏色變化。

3. 信號(hào)量化與分析：當(dāng)酶標(biāo)記的抗體或抗原與樣品中的對(duì)應(yīng)抗原或抗體結(jié)合后，形成的復(fù)合物會(huì)在加入特定底物后產(chǎn)生顏色反應(yīng)。此顏色的深淺與樣品中目標(biāo)分子的濃度直接相關(guān)，即濃度越高，顏色越深。通過(guò)比色測(cè)定，可以定量分析出樣品中目標(biāo)抗原或抗體的精確含量，從而實(shí)現(xiàn)對(duì)特定分析物的定性及定量檢測(cè)。

ELISA技術(shù)憑借其獨(dú)特的優(yōu)勢(shì)，如高靈敏度、特異性強(qiáng)、操作簡(jiǎn)便快捷、結(jié)果穩(wěn)定及易于自動(dòng)化等特點(diǎn)，已被廣泛應(yīng)用于多個(gè)領(lǐng)域的研究與診斷中。它不僅能夠用于多種傳染病、寄生蟲(chóng)病以及非傳染性疾病標(biāo)志物的免疫診斷，還能實(shí)現(xiàn)大分子和小分子抗原的精確定量，適用于臨床樣本檢測(cè)及大規(guī)模血清流行病學(xué)調(diào)查。此外，ELISA的應(yīng)用范圍還在不斷拓展，涵蓋了細(xì)胞內(nèi)成分的免疫酶定位、抗酶抗體的研究、微量免疫復(fù)合物的可視化，以及體液中抗原或抗體的精確定量分析，彰顯了其在生物醫(yī)學(xué)研究和疾病早期診斷中的重要價(jià)值。