六味地黃丸處方為：熟地黃160g，山茱萸(制)80g，牡丹皮60g，山藥80g，茯苓60g，澤瀉60g。2005版《中國藥典》采用高效液相色譜法測定了山茱萸中馬錢苷和牡丹皮中丹皮酚的含量。有關(guān)六味地黃丸制劑的含量測定方法總結(jié)如下。

　　一、2005《中國藥典》六味地黃丸含量測定項(xiàng)下：

　　山茱萸：

　　色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)：十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑;以四氫呋喃-乙腈-甲醇-0.05%磷酸溶液(1：8：4：87)為流動相;檢測波長為236nm，柱溫40℃。理論板數(shù)按馬錢苷峰計應(yīng)不低于4000。

　　供試品溶液的制備：取本品水蜜丸或小蜜丸，切碎，取約0.7g，精密稱定;或取重量差異檢查項(xiàng)下的大蜜丸，剪碎，取約0.1g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入50%甲醇25ml，密塞，稱定重量，超聲提取(功率250W，頻率33kHZ)15分鐘，放冷，再稱定重量，用50%甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過。精密量取續(xù)濾液10ml，置中性氧化鋁柱(100～200目，4g，內(nèi)徑1cm，干法裝柱)上，用40%甲醇適量使溶解，并轉(zhuǎn)移至10ml量瓶中，加50%甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得。

　　牡丹皮

　　色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)：以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑;以甲醇-水(70：30)為流動相;檢測波長為274nm。理論板數(shù)按丹皮酚峰計應(yīng)不低于3500。

　　供試品溶液的制備：取本品水蜜丸或小蜜丸，切碎，取約0.3g，精密稱定;或取重量差異檢查項(xiàng)下的大蜜丸，剪碎，取約0.4g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入50%甲醇50ml，密塞，稱定重量，超聲提取(功率250W，頻率33kHZ)45分鐘，放冷，再稱定重量，用50%甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。

　　二、以單皮酚為指標(biāo)

　　李瑋玲等采用SPE-HPLC法測定六味地黃丸中丹皮酚的含量。高效液相色譜儀為Waters2695;色譜柱為HypersilODS2柱(205mm×4.6mm,5μm);流動相為甲醇-2%冰醋酸(55：45);流速為1.0mL/min;檢測波長為275nm;柱溫25℃。樣品用甲醇超聲提取后經(jīng)Sep-PakC18微柱處理，收集第12～14mL流出液。

　　仲英等采用薄層掃描測定了六味地黃丸中丹皮酚的含量，采用日本島津CS-910雙波長薄層掃描儀。層析條件：硅膠G板;展開溶劑：環(huán)乙烷-氯仿-無水乙醇7：3：1。薄層掃描條件：反射法鋸齒掃描，波長s=274nm,R=365nm;掃描速度20mm/min;狹縫1.25×1.25mm;Sx=3。樣品用無水乙醇回流提取。

　　汪顯陽等用差示光譜法測定六味地黃丸中丹皮酚的含量，采用島津UV2240分光光度計,751G分光光度計。樣品用乙醇浸出提取,缺丹皮酚樣品為空白樣品。以蒸餾水和0.01mol/L氫氧化鈉溶液分別定容,選擇352nm為測定波長,370nm為參比波長。

　　趙新峰等用膠束電動毛細(xì)管色譜法分離測定中藥材牡丹皮及中成藥六味地黃丸中丹皮酚的含量。定量采用內(nèi)標(biāo)法,選取蘆丁為內(nèi)標(biāo)。Unimicro毛細(xì)管電泳儀美國Hyperquan.Inc公司。所用毛細(xì)管規(guī)格為55cm有效長度50cm×75um,檢測波長274nm,電壓15kV,背景電解質(zhì)分別為30mmol/LSDS-30mmol/L硼砂,20mmol/LSDS-50mmol/L硼砂pH9.4。供試品溶液的配制：牡丹皮藥材加95%乙醇超聲提取;六味地黃丸粉碎后,與5g硅藻土色譜載體,40～60目混研,研勻,烘干,無水乙醇。

　　宋麗麗等用近紅外光譜法測定六味地黃丸中丹皮酚，分別采用偏最小二乘PLS、主成分分析-BP神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)、小波變換-BP神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)對所采集的樣本數(shù)據(jù)進(jìn)行處理。

　　完茂林等測定六味地黃丸中丹皮酚的含量，采用毛細(xì)管氣相色譜法,以正十六烷為內(nèi)標(biāo)。日本島津GC-9A氣相色譜儀;色譜柱為熔融彈性毛細(xì)管柱28m×0.28mm,5um,涂布SE-300.26um,N2流速60ml/min,H2流速50ml/min,空氣流速500ml/min,柱溫180℃,汽化器、檢測器320℃。樣品制備：六味地黃丸研細(xì)用乙醇超聲處理后用中性氧化鋁柱100～200目,10g,φ11mm處理，收集乙醇洗脫液，濃縮并定容。

　　三、以齊墩果酸或熊果酸為指標(biāo)

　　馮燕芹等測定六味地黃丸(濃縮丸)中熊果酸的含量，采用HPLC法。色譜柱為ALLTIMAC185μ;流動相為甲醇-水(80：20);流速為0.5mL/min;ELSD檢測器漂移管溫度：80℃。樣品用乙醚回流提取。

　　丁晴等測定六味地黃丸及六味地黃膠囊中齊墩果酸、熊果酸的含量，采用HPLC法。高效液相色譜儀為島津LC-10AD;色譜柱為Shim-PackC18分析柱4.6mm×150mm,5μm;流動相為乙腈-甲醇-水-乙酸胺70：16：14：0.5;流速1mL/min;檢測波長215nm;柱溫為室溫。樣品處理方法：六味地黃丸(濃縮丸)用水溶解并過濾后，用乙醚加熱回流提取，殘渣用石油醚(30～60℃)浸泡，棄去石油醚液，殘渣用甲醇溶解并定容。

　　四、以馬錢素為指標(biāo)

　　陳賀新等測定六味地黃丸中馬錢素的含量，采用RP-HPLC法。高效液相色譜儀為Waters510;色譜柱為YWG-C18柱(150mm×4.6mm,5μm);流動相為甲醇-水(1：4);流速為0.8mL/min;檢測波長為238nm。樣品用甲醇超聲提取。

　　五、多糖、梓醇等

　　汪顯陽等采用苯酚硫酸法測定了六味地黃丸中多糖的含量。供試品溶液的制備：精密稱取1g六味地黃丸粉末，加80%乙醇加熱回流提取，過濾，殘渣用80%熱乙醇洗滌，再用蒸餾水洗滌，熱蒸餾水洗滌，合并水濾液用蒸餾水定容。

　　劉長河等用薄層掃描法測定了六味地黃丸中梓醇的含量，薄層條件：硅膠G板，展開劑為氯仿-甲醇-水(7：3：0.5);碘蒸汽顯色。薄層掃描條件：單波長反射鋸齒掃描，掃描波長為350nm，狹縫1.2mm×1.2mm，Sx=3。

　　六味地黃丸用80%乙醇超聲處理后，經(jīng)D101型大孔吸附樹脂純化：先以水50ml洗脫，棄去;以20%甲醇50ml洗脫，合并洗脫液，濃縮并定容。

　　趙新峰等測定中藥材山茱萸及中成藥六味地黃丸中沒食子酸的含量，采用毛細(xì)管區(qū)帶電泳法，選取肉桂酸為內(nèi)標(biāo)。所用毛細(xì)管規(guī)格為60cm有效長度45cm×75μm,檢測波長271nm,電壓20kV,背景電解質(zhì)為20mmol/L硼砂，重力進(jìn)樣10cm×5s，電泳溫度20℃,每次運(yùn)行前依次用0.1mol/LNaOH溶液、去離子水、電泳緩沖溶液沖洗3min。六味地黃丸用95%乙醇處理。