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黃曲霉毒素分析方法匯總

[2012/6/13]

  一、多功能凈化柱+KRC光化學(xué)柱后衍生法

  1 簡介

  多功能凈化柱是由多種固相復(fù)合填料不僅包括大分子物質(zhì),更重要的是含有多種活性親脂性(非極性)和帶電(極性)物質(zhì),用來吸附各種酯類,葉黃素,化學(xué)物質(zhì),碳水化合物和蛋白質(zhì)等干擾物。多功能凈化柱+KRC衍生法就是利用PRIBOLAB公司的Pribofast 226/260多功能凈化柱可以將黃曲霉毒素B1、B2、G1、G2很好的分離出來,然后用HPLC/FLD+KRC柱后衍生系統(tǒng)可以有效的測定黃曲霉毒素 B1、B2、G1、G2含量。

  2 多功能凈化柱特點(diǎn):

  2.1 多功能凈化柱可以簡化樣品提取、凈化步驟,無需清洗和洗提。

  2.2 可以實(shí)現(xiàn)多種毒素檢測,有效降低檢測成本;

  2.3 HPLC+FLD+KRC衍生化,可以有效提高檢測靈敏度,實(shí)現(xiàn)較低的檢測限(黃曲霉毒素B1 0.05ppb);

  2.4 光化學(xué)衍生操作簡便,無需使用衍生試劑(通常電化學(xué)柱后衍生均需要使用衍生試劑,分析成本高,操作麻煩,儀器故障率較高);

  2.5 一步法凈化,回收率高達(dá)90%左右。

  2.6 廣泛適用于各類農(nóng)產(chǎn)品:谷物、淀粉、動(dòng)物飼料、食品、堅(jiān)果、棉籽等。

  3 多功能凈化柱/KRC衍生法操作步驟簡介:

  3.1 提取樣品:研磨粉碎、稱重25g樣品;用乙腈/水(84/16 V/V)混合樣品,

  高速均質(zhì) 1 分鐘。

  3.2 過濾:將提取的樣品定量濾紙過濾,收集濾液;

  3.3 取4-6ml濾液快速通過 多功能凈化柱PribofastM226 或Pribofast M260

  3.4 收集過柱溶液,直接用于HPLC檢測,KRC衍生化后直接記錄黃曲霉毒素濃度。

  二、免疫親和柱+KRC光化學(xué)柱后衍生法

  1 簡介

  Pribofast黃曲霉毒素總量免疫親和柱可選擇性吸附樣品液中的毒素,從而對(duì)毒素樣品起到非常針對(duì)性的純化作用,然后用HPLC/FLD+KRC柱后衍生系統(tǒng)可以有效的測定黃曲霉毒素 B1、B2、G1、G2濃度,提高檢測的準(zhǔn)確性和靈敏度。

  2 免疫親和柱/KRC衍生法特點(diǎn):

  2.1 特異性很強(qiáng)使得樣品凈化效果極佳;

  2.2 使用免疫親和柱操作架可以使樣品凈化快速,提高檢測效率高

  2.3 HPLC+FLD+KRC柱后衍生化,有效提高檢測靈敏度,實(shí)現(xiàn)較低的檢測限 (黃曲霉毒素B1 0.05ppb)。

  2.4 衍生化操作方便,光化學(xué)衍生化無需使用衍生試劑(通常電化學(xué)柱后衍生均需要使用衍生試劑,分析成本高,操作麻煩,儀器故障率較高)。

  2.5 回收率高,達(dá)到90%以上

  3 免疫親和柱法操作步驟簡介:

  3.1 提取樣品:研磨、稱重50g樣品;用甲醇/水(80/20 V/V)混合物將樣品

  高速混勻 1 分鐘。

  3.2 過濾:將提取的樣品濾膜過 玻璃纖維濾紙,

  3.3 將回溫的免疫親和柱安裝在泵流操作架進(jìn)行過柱凈化:經(jīng)過Pribofast黃曲霉毒素總量免疫親和柱(IAC-010-3)活化、淋洗、洗脫三步驟,洗脫下來的溶液可直接用于HPLC檢測;

  3.4 測定:HPLC直接進(jìn)樣,經(jīng)色譜柱、KRC光化學(xué)柱后衍生化后直接記錄黃曲霉毒素濃度;

  三、酶聯(lián)免疫法檢測黃曲霉毒素總量

  1 采取直接競爭ELISA方法,利用酶標(biāo)儀測定樣品和標(biāo)準(zhǔn)品的樣本的吸光值計(jì)算得到樣品中黃曲霉毒素總量的含量。

  2 試劑盒檢測時(shí)間:15分鐘+15分鐘

  3 檢測限:0.1ppb

  4 交叉反應(yīng)率:

  Aflatoxin B1100%

  Aflatoxin B280%

  Aflatoxin G1101%

  Aflatoxin G2100%

  AflatoxinM125%

  關(guān)于Pribofast KRC 柱后衍生器和 HPLC參數(shù)

  ●Pribofast KRC 柱后光化學(xué)衍生器 波長:254 nm

  ●HPLC-色譜柱: 黃曲霉毒素專用色譜柱150 x 4.6 mm; C-18

  ●流動(dòng)相: 甲醇/水 (45/ 55 v / v)

  ●流量:1.0 mL/min 柱溫: 30 °C

  ●進(jìn)樣體積:20μL

  ●熒光檢測器:λ-激發(fā)波長:365 nm λ-發(fā)射波長:440 nm

  ●高效液相色譜儀需要配制:PriboLab公司Pribofast KRC 柱后光化學(xué)衍生器,含有1ml反應(yīng)池,納米燈管254nm

  關(guān)于黃曲霉毒素專用色譜柱:

  產(chǎn)品貨號(hào)產(chǎn)品名稱及規(guī)格數(shù)量

  IAC-010-3Pribofast, Aflatoxins B1, B2, G1, G2 25 columns/pck 3mL, widebore column

  黃曲霉素總量免疫親和柱3ml,25支/盒1盒

  M226PriboFast®226 Multifunctional cleanup column for Aflatoxin and zearalenone

  霉菌毒素多功能凈化柱,用于黃曲霉毒素玉米赤霉烯酮檢測25支/盒1盒

  PriboFast® 260PriboFast® 260 Multifunctional cleanup column for Aflatoxin and zearalenone

  霉菌毒素多功能凈化柱,用于黃曲霉毒素玉米赤霉烯酮檢測25支/盒1盒

  PR K010-96Pribofast ELISA Kit (96-well plate/stripes) for detection of Aflatoxin B1, B2, G1, G2 in food and feed samples

  黃曲霉素 總量ELISA試劑盒包,96孔1盒

  STD#1081Standard, Solution of 4 different aflatoxins in acetonitrile B1, G1

  黃曲霉素B1B2G1G2 混合標(biāo)樣。1ml裝,4度陰暗保存

  也可提供黃曲霉毒素B1B2G1G2 四種單獨(dú)的固體裝標(biāo)準(zhǔn)品。1盒

  KRC-25Photochemical Reactor for Enhanced Detection Aflatoxin B1, B2, G1, G2; Pribofast KRC-25 230V 50 HzUVE 254 nm lamp

  Pribofast KRC 光化學(xué)柱后衍生反應(yīng)系統(tǒng),254nm納米紫外燈1套

  ODS-150HPLC-Column for Aflatoxin Analysis, C18 150 x 4.6 mm 黃曲霉毒素專用液相色譜柱1根

  泵流操作架/免疫親和柱操作架,用于免疫親和柱樣品凈化操作

  (含氣泵 轉(zhuǎn)換頭等配件,多用連接頭是選配)1套

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